Interferonet rekombinante janë një grup barnash antivirale që përdoren për qëllime terapeutike dhe profilaktike. Këto proteina biologjikisht aktive sintetizohen natyrshëm në qelizat njerëzore në përgjigje të depërtimit të agjentëve të huaj. Në mjekësinë moderne, këto barna njihen si më të efektshmet dhe më të sigurtat për trajtimin e sëmundjeve virale.
Klasifikimi
Në mikrobiologji, ekzistojnë më shumë se 20 lloje të interferoneve (IFN), të cilat ndryshojnë në vetitë dhe strukturën biologjike. Ilaçet e bazuara në to klasifikohen si më poshtë:
- Sipas llojit të përbërësit aktiv: o alfa-interferon (ose leukocit); o beta-interferon (fibroblast); o gama-interferon (imun); o lambda-interferon.
- Sipas mënyrës së marrjes: o natyrale, e përftuar nga leukocitet e gjakut të njeriut; o interferoni njerëzor rekombinant, i prodhuar në mënyrë sintetike (nga inxhinieria gjenetike).
Interferonet alfa dhe beta kombinohen në familjen Illoji për shkak të ngjashmërisë së funksioneve të tyre në trup dhe sekuencave të njëjta të aminoacideve. Interferonet gama dhe lambda janë të izoluara përkatësisht në lloje të veçanta II dhe III. Gjenerata e parë e proteinave natyrore kishte një pengesë të madhe - kërkonte përdorimin e lëndëve të para të pakta (gjaku dhurues) dhe një shkallë të lartë pastrimi nga proteinat e huaja. Kjo çoi në kosto të lartë dhe efikasitet të ulët të tyre. Alfa-interferonet rekombinante aktualisht zënë një pozitë udhëheqëse midis barnave të këtij lloji për sa i përket shkallës së studimit dhe gjerësisë së aplikimit në praktikën mjekësore.
Karakteristikat
Përveç klasifikimit të mësipërm, këto proteina ndryshojnë në nëntipe. Pra, kategoria e interferoneve rekombinante alfa 2 përfshin të paktën 24 nëntipe që ndryshojnë nga njëri-tjetri në 24 gjene. Ato nuk janë plotësisht identike në strukturën parësore.
Ndryshe nga interferonet alfa, modifikimi beta kodohet vetëm nga një gjen i njohur. Të dy llojet e proteinave aktivizohen nga viruset dhe përdorin të njëjtët receptorë në mekanizmin e tyre të veprimit në qelizat e tjera.
Nëntipi i interferonit rekombinant human alfa-2b ndryshon nga alfa-2a nga dy mbetje aminoacide në strukturë. Pjesa tjetër e tyre (dhe ka më shumë se njëqind në total) janë të njëjta. Prandaj, sëmundjet për të cilat përdoren, si dhe efektet anësore janë të njëjta, por reagimi i organizmit (prodhimi i antitrupave) është i ndryshëm.
Interferonet natyrale të leukociteve klasifikohen gjithashtu sipas shkallës së pastrimit:
- Native, e karakterizuar nga pastrimi i cekët dhesa më afër lëndës së parë origjinale. Ata kanë potencialin më të madh për efektet imunobiologjike.
- I koncentruar, shumë i pastruar. Ato përdoren më shpesh në rastet kur duhet të administrohet një dozë e madhe e vetme. Homogjeniteti i përbërjes së këtyre preparateve arrin në 90%.
- Të kombinuara. Ato merren me metoda të buta pastrimi. Prania e citokinave shtesë e bën të vështirë standardizimin e këtyre substancave. Në të njëjtën kohë, për shkak të këtij faktori, ato kanë një efekt imunomodulues më të lartë, gjë që kontribuon në zgjerimin e fushëveprimit të tyre.
Interferoni human rekombinant përmban një proteinë monospecifike. I përket një prej nënllojeve. Lloji b1a në përgatitjet e interferonit alfa rekombinant karakterizohet nga një formë e glikoziluar (shtimi jo enzimatik i mbetjeve të sheqerit në molekulat e proteinave organike), dhe b1b është i paglikolizuar. Interferone të tilla janë 98% homogjene në përbërje.
Këto veçori të proteinave natyrale dhe të sintetizuara artificialisht përcaktojnë ndryshimin në fushën e tyre të aplikimit. Interferonet rekombinante kanë efekte mbizotëruese antivirale dhe antitumorale. Në natyrë, është imunomodulues dhe ka një aktivitet më të lartë ndaj patologjive bakteriale dhe purulente-septike.
Përgatitje interferoni rekombinante
Më të përdorurat nga ky grup i barnave janë këto:
- interferoni alfa 2a: "Reaferon","Viferon", "Roferon", "Interal";
- interferoni alfa 2b: "Intron-A", "Laifferon", "Peginterferon", "Infagel", Inrek;
- interferon alfa 2c: "Berofor";
- beta-interferon: "Interferon-beta-1a", "Fron", "Rebif", "Avonex", "Betaseron", "Betaferon";
- gama-interferon: "Aktimmun", "Gammaferon", "Ingaron", "Imukin".
Sëmundjet
Interferonet rekombinante janë aktive në trajtimin e sëmundjeve të tilla si:
- patologjitë dermatologjike: herpes gjenital, lytha, kondiloma, papillomatozë, herpes;
- sëmundjet oftalmike: pezmatimi i kornesë së syrit i shkaktuar nga infeksioni herpetik ose adenovirus (zvogëlimi i kohëzgjatjes së sëmundjes, rritja e periodave të përsëritura);
- sëmundjet akute infektive të traktit të sipërm respirator: gripi, SARS (parandalimi urgjent për personat në rrezik, si dhe për qëllime mjekësore);
- patologjitë e sistemit hepatobiliar: hepatiti viral B, C në formë akute dhe kronike (efekt i theksuar klinik, ulje e vdekshmërisë deri në 60%);
- AIDS: normalizimi i imunitetit, reduktimi i ashpërsisë së sëmundjes në më shumë se gjysmën e pacientëve; rreziku i reduktuar i sarkomës Kaposi të lidhur me AIDS;
- patologji të tjera: CMVI (infeksioni citomegalovirus), i cili shfaqet në sfondin e gjendjeve të mungesës së imunitetit (interferonet përdoren për tëparandalimi), si dhe pas operacioneve të transplantimit; panencefaliti sklerozant (inflamacion i trurit).
Këto preparate karakterizohen nga një spektër universal i aktivitetit antiviral. Ndryshe nga agjentët kimioterapeutikë, ato nuk çojnë në shfaqjen e formave rezistente të patogjenëve, por ndikojnë në faktorët e imunitetit të lindur, natyror.
Historia e zbulimit
Interferonet u zbuluan pothuajse 50 vjet më parë. Ilaçet e para u morën nga gjaku i dhuruesve. Për ta bërë këtë, qelizat e gjakut u trajtuan me viruse, pas së cilës ata filluan të prodhojnë proteina me veti mbrojtëse. Interferoni i marrë në këtë mënyrë ishte shumë efektiv, por prodhimi i tij në një shkallë të gjerë pengohej nga mungesa e lëndëve të para. Për shembull, për të marrë sasinë e barit të nevojshëm për të trajtuar 1 pacient me kancer, ishte e nevojshme të mblidhej gjak nga 200 dhurues.
Në mesin e viteve 80 të shekullit XX, u shfaqën parakushtet e para për marrjen e interferoneve sintetike rikombinante. Zhvillimi i shpejtë i inxhinierisë gjenetike në këto vite çoi në krijimin e një teknologjie të re - futjen e gjenit të duhur në kolonitë e qelizave bakteriale Pseudomonas putida që mund të shumohen me shpejtësi. Kjo lejoi sintezën e interferonit rekombinant alfa 2b njerëzor në një shkallë industriale. Ilaçi i parë i krijuar në BRSS u quajt Reaferon.
Në vitet në vijim, u kryen studime të plota te kafshët mbi këtë ilaçsubjekt i vetive teratogjene dhe toksike. Testet kanë konfirmuar sigurinë e tij për fetusin dhe mungesën e dallimeve midis efekteve anësore të interferonit të sintetizuar artificialisht dhe atij natyral.
Më vonë, bakteret E. coli filluan të përdoren për të marrë interferonin rekombinant, pasi ato e prodhojnë këtë substancë më shpejt. Ilaçi i parë i marrë në bazë të tyre quhej "Reaferon-EC" (nga shkurtimi i emrit latin të këtij mikroorganizmi Escherichia coli). Këto baktere përdoren gjithashtu në prodhimin më modern të interferoneve rekombinante.
Parimi i funksionimit
Interferonet janë një lloj ndërmjetësuesish biologjik që aktivizojnë sistemin imunitar të njeriut. Ato kontribuojnë në njohjen dhe shtypjen e informacionit gjenetik të huaj. Me futjen e viruseve në qelizë, pas disa minutash, numri i patogjenëve rritet shumëfish. Ato përhapen më tej, duke prekur qelizat e shëndetshme dhe duke u shumuar sërish. Ky proces ndodh veçanërisht shpejt në fazën fillestare të sëmundjes, pasi gjatë kësaj periudhe trupi i njeriut nuk është në gjendje të prodhojë sasinë e nevojshme të interferonit.
Falë këtyre proteinave, nxitet sinteza e një numri enzimash, antitrupash dhe komponentësh të tjerë të mbrojtjes imune. Si rezultat, qelizat bëhen imune ndaj viruseve. Dallohen gjithashtu mekanizmat e mëposhtëm, në të cilët përfshihen interferonet:
- stimulimi i makrofagëve, aktivizimi i tyre për të absorbuar qelizat e prekura jo të qëndrueshme;
- frenimi i rritjes dhe shkatërrimi i qelizave jonormale(efekt antitumor);
- ndikimi në imunocitet (limfocitet e prodhuara në palcën e eshtrave) - qelizat kryesore të sistemit imunitar: qelizat NK, limfocitet T, monocitet, makrofagët dhe granulocitet; stimulimi i citotoksicitetit të tyre jospecifik;
- aktivizimi i sintezës së proteinave që rrisin rezistencën e qelizave ndaj agjentëve të huaj, transferimi i këtyre proteinave në qelizat fqinje;
- fillimi i një kaskade reaksionesh që stimulojnë prodhimin e faktorëve anti-inflamator (efekt anti-inflamator);
- aktivizimi i sintezës së IFN-së vetjake, i cili redukton kohën e rikuperimit.
Veprimi antiviral veçanërisht i ndritshëm është tipik për interferonet rekombinante alfa 2b, 2a dhe beta. Ata bllokojnë prodhimin e proteinave virale dhe parandalojnë riprodhimin e patogjenëve. Një nga avantazhet e rëndësishme të barnave të bazuara në to është toksiciteti minimal dhe mundësia e përshkrimit në fëmijëri.
Sintezë
Marrja e interferoneve rikombinante ndodh në faza:
- izolimi i ARN mesazher pas aktivizimit të prodhimit të interferonit në kulturën bakteriale;
- sinteza e ADN-së plotësuese bazuar në ARN;
- përfshirja e ADN-së së marrë në fazën e mëparshme në vektorët plazmidë - molekula ekstrakromozomale të ADN-së të afta për kopjim të pavarur brenda qelizave bakteriale dhe përgjegjëse për prodhimin e proteinave;
- marrja e ADN-së rekombinante;
- sinteza e kloneve të mikroorganizmave që prodhojnë interferon;
- riprodhimi i bakterevekultura në një mjedis ushqyes;
- izolimi i qelizave bakteriale me centrifugim;
- precipitimi i proteinave të interferonit nga tretësira;
- pastrimi i interferonit rekombinant me kromatografi afiniteti ose metoda të tjera.
Përhapja e kulturës së klonit bëhet në kushte industriale në reaktorë, dhe fazat e mëparshme - në laboratorë. IFN-të rekombinante prodhohen jashtë trupit të njeriut, gjeni i interferonit njerëzor është i përfshirë në materialin e tyre gjenetik.
Ka disa kultura bakteriale nga të cilat merren këto proteina. Më poshtë është nga çfarë përbëhet interferoni rekombinant alfa 2b:
- Escherichia coli (akumulimi i produktit ndodh brendaqelizore);
- bakteri i sanës Bacillussubtilis (që çliron interferonet në mjedis);
- Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa;
- kërpudhat maja Saccharomycopsis fibuligera.
Lloji i fundit i prodhuesve ka përparësitë e mëposhtme mbi të tjerët:
- mundësia e përdorimit të mediave të lira të kulturës;
- ndarje e lehtë kur ndahet;
- performancë e lartë e procesit (më shumë se 10 herë në krahasim me të tjerët);
- procesi i shtimit të grupeve të karbohidrateve, i ngjashëm në mekanizëm me atë në qelizat shtazore.
Formularët e lëshimit
Interferonet rekombinante 2b, 2a dhe beta janë të disponueshme në format e mëposhtme të dozimit:
- tretësira injektuese;
- liofilizon;
- pika dhe filma përsy;
- tretësira orale;
- qirinj dhe mikroklistera për administrim rektal dhe vaginal;
- pomada;
- xhel;
- pilula;
- aerosole;
- vezikula sferike (liposome).
IFN rekombinante alfa
Alfa-Interferonet sintetike janë plotësisht në përputhje me proteinat natyrale. Ato luajnë një rol të rëndësishëm në nxitjen e përgjigjes imune në trupin e njeriut, aktivizojnë prodhimin e citokineve të rëndësishme, ndërmjetësojnë midis imunitetit të lindur dhe atij adaptiv dhe sigurojnë "kujtesë" imunologjike.
Tabela e mëposhtme tregon karakteristikat kryesore të disa preparateve të interferonit rikombinant të këtij lloji:
| Emri | Lloji | Formulari i botimit | Indikacione |
| "Reaferon-ES" | Alfa 2a | Lyofilizat për tretësirë për injeksion dhe përdorim topik, ampula dhe flakone |
Të rriturit:
Fëmijët mbi 1 vjeç:
|
| "Viferon" | Alfa 2a | Suppositories rektale |
Të rriturit dhe fëmijët:
Tek të porsalindurit:
|
| "Roferon-A" | Alfa 2a | Tubë shiringe |
Patologjitë virale:
Çrregullime të sistemit limfatik:
Tumoret:
|
| "Interal-P" | Alfa 2a | Liofilizat për tretësirë për injeksion |
Të rriturit:
Fëmijët:
|
| "Intron-A" | Alfa 2b | Zgjidhje për injeksione intravenoze dhe s/c |
Sëmundjet virale dhe malinje:
|
| "Laifferon" | Alfa 2b | Tretësirë për injeksion intramuskular dhe instilim në sy | Ngjashëm me "Interal-P" |
| "Infagel" | Alfa 2b | Xhel në tuba për përdorim të jashtëm | Trajtimi i herpesit, parandalimi i gripit dhe SARS |
| "Rialdiron" | Alfa 2b | Liofilizatë për administrimin IM dhe IV | Sëmundjet e përshkruara për Intron-A, si dhe encefaliti i lindur nga rriqrat, mycosis fungoides dhe sindroma Cesari |
| "Berofor" | Alfa 2c | Pikë sysh në pipeta kapilare | Infeksionet virale të syve |
Drogat e rejagjeneratat janë alfa-IFN të pegiluara (ose të konjuguara), të cilat karakterizohen nga një veprim i zgjatur. Ato tregojnë efikasitet të lartë në trajtimin e hepatitit viral. Këto përfshijnë Pegasys (IFN-α-2a) dhe Pegintron (interferoni rekombinant njerëzor 2b).
beta-IFN rekombinante
Ndër beta-interferonet, aktualisht dallohen 2 nëntipe - b1a (glikoziluar) dhe b1b (i pa glikolizuar). Përveç efekteve antivirale dhe imunomoduluese, ato ndikojnë në sistemin nervor dhe përdoren për trajtimin e sklerozës së shumëfishtë. Ilaçet administrohen në mënyrë subkutane ose intramuskulare. Është vërtetuar klinikisht se reduktimi i shpeshtësisë së përkeqësimeve të sëmundjes ndodh me pothuajse një të tretën, por ende nuk ka kritere të qarta për vlerësimin e efektivitetit.
Mekanizmi i veprimit të barnave të tilla bazohet në fenomenet e mëposhtme:
- Lidhja e interferoneve me receptorët specifikë në sipërfaqen e qelizës, duke aktivizuar kështu prodhimin e proteinave me efekte antivirale, antitumorale, anti-inflamatore.
- ulja e numrit të vatrave të reja të lezioneve sklerotike të trurit dhe ndryshimeve atrofike në indet e tij (konfirmuar nga të dhënat MRI).
- Inhibimi i ndarjes së leukociteve dhe migrimi i tyre në zonën e inflamacionit duke reduktuar prodhimin e enzimave proteolitike.
- Rritja e zbërthimit të gama-interferonit, i cili luan një rol të rëndësishëm në zhvillimin e sklerozës së shumëfishtë.
gama-rekombinanteIFN
Në Rusi, interferoni gama rekombinant prodhohet më gjerësisht si pjesë e ilaçit "Ingaron". Përdoret në trajtimin e sëmundjeve të tilla si:
- grip (përfshirë gripin e derrit);
- otitis media (forma aerosol e barit);
- sëmundje granulomatoze;
- osteopetroza (oskleroza e lindur familjare);
- hepatiti viral kronik B, C;
- SIDA;
- tuberkulozi pulmonar;
- patologji onkologjike;
- infeksionet urogjenitale;
- herpes gjenital dhe herpes;
- HPV;
- prostatiti kronik.
Forma e aerosolit e interferonit gama rekombinant human përdoret gjithashtu për parandalimin e gripit (vajtje e hundës dhe nazofaringit). Kjo substancë bllokon prodhimin e polipeptideve përgjegjës për zhvillimin e ndryshimeve fibrotike në mëlçi dhe indet e mushkërive.
Efektet anësore
Kur trajtohet me interferone alfa dhe gama, sindroma e ngjashme me gripin më së shpeshti vërehet si efekte anësore. Ai përfshin veçori të tilla si:
- rritje e temperaturës së trupit;
- dhimbje koke dhe dhimbje muskulore;
- ftohje;
- dobësi.
Këto simptoma zakonisht shfaqen gjatë javës së parë ose të dytë të trajtimit. Ato mund të eliminohen duke reduktuar dozën.
Efektet anësore të mëposhtme janë më pak të zakonshme:
- dispepsi;
- përkeqësim i gjumit;
- trombocitopeni;
- ulje e nivelit të leukociteve nëgjak;
- intoksikim nga hormonet tiroide.
Kur merrni beta-interferone, mund të ndodhin edhe fenomenet e mëposhtme negative:
- hipertension;
- takikardi;
- aritmi;
- dhimbje zemre;
- dështimi i zemrës;
- ulje në inteligjencë;
- çrregullime mendore - depresion, ide vetëvrasëse, depersonalizim, kriza epileptike.
