Hepatiti C është një infeksion i mëlçisë i shkaktuar nga virusi Flaviviridae HCV, i cili përbëhet nga një ose më shumë molekula ARN. Si rregull, ndërmerren një sërë masash diagnostikuese për vendosjen e hepatitit C te pacienti. PCR është një analizë që konfirmon me saktësi diagnozën. Shpesh përfundimi jepet nga mjekët kur pacienti tashmë ka shenjat e para të sëmundjes.
Çfarë është hepatiti C
Dëmtimi i mëlçisë nga një infeksion viral i transmetuar nëpërmjet gjakut ose kontaktit seksual quhet në mjekësi hepatiti C. Agjenti shkaktar është një virus që përmban ARN i agjentëve infektues joqelizor të familjes Flaviviridae. Infeksioni mund të qëndrojë në trup për një kohë të gjatë pa u shfaqur. Prandaj, vetëm kur një mikroorganizëm zbulohet duke përdorur një test gjaku duke përdorur ARN PCR, hepatiti C (si diagnozë) konsiderohet i justifikuar.
Flavivirus nuk prodhohet në qeliza të izoluara të rritura artificialisht. Në procesin e riprodhimit, agjenti infektiv krijon modifikime imunologjikisht të dallueshme. Këta faktorë e pengojnë trupin të japëreagimi i duhur mbrojtës dhe ekspertët kanë vështirësi në zhvillimin e një vaksine efektive.
Virusi transmetohet parenteralisht. Për infeksion, ai duhet të hyjë në sasi të mjaftueshme direkt në qarkullimin e gjakut.
Çfarë analizash bëhen për hepatitin C
Patologjitë virale të mëlçisë diagnostikohen duke përdorur teste laboratorike. Studimet klinike të hepatitit C kryhen duke studiuar antigjenet e huaj dhe të rrezikshëm ose komponimet proteinike (antitrupat) në biomaterialin e pacientit, kryesisht në gjak.
- Imunoterapia enzimatike (ELISA). Metoda bazohet në zbulimin e antitrupave lgM në gjak. Imunoglobulina konsiderohet më e madhja dhe është një pentamer. Ajo manifestohet në përgjigjen parësore mbrojtëse të limfociteve ndaj një substance të huaj të panjohur.
- Radioimmunoassay (RIA) - përcaktimi sasior i imunoglobulinës lgM duke përdorur një izotop radioaktiv të etiketuar të jodit.
- PCR e hepatitit C - përcaktimi i ARN virale në biomaterial (gjak). Kjo analizë konfirmon me besueshmëri diagnozën.
Testimi IgG nuk është i besueshëm. Prania e tij në serumin e gjakut mund të tregojë jo vetëm praninë e një flavivirusi, por edhe një infeksion tjetër të kaluar që ka të njëjtin patogjen.
Çfarë përcakton analizën PCR
Reaksioni zinxhir i polimerazës (PCR) bazohet në identifikimin e rajoneve të ADN-së specifike për patogjenë të caktuar në mostrat e materialit për kërkime (epiteli, gjaku). Analiza bën të mundur identifikimin e organizmave më të vegjël patogjenë (viruset) duke zbuluar ARN-në ose ADN-në e tyre në materialin biologjik.
Procedura laboratorike për zbulimin e antitrupave PCR e hepatitit C kryhet në 3 faza:
- Zgjidh. Biomateriali i studiuar pastrohet nga papastërtitë dhe ADN-ja merret në fazën e lëvizshme të kolonës kromatografike.
- Amplifikimi. Analiza kryhet në cikluesin e pajisjes-termostat. Ngroh dhe ftoh epruvetat me një ciklik të caktuar. Për një studim kryhen deri në 35 cikle. Rezultati është një numër i mjaftueshëm i fragmenteve të ADN-së për të zbuluar, identifikuar dhe vlerësuar patogjenin.
- Elektroforezë. Fragmentet që rezultojnë vendosen në një xhel me ngopje të ndryshme të agarozës dhe kryhet elektroforeza. Elektroferogrami që rezulton analizohet në një kompjuter.
Përdoret jo vetëm studimi standard PCR, por edhe analiza PCR në kohë reale. Ky është një diagnozë në kohë reale. Metoda lejon analiza cilësore dhe sasiore, e cila bën të mundur identifikimin e formimit dhe dinamikës së sëmundjes, si dhe përshkrimin e terapisë që synon eliminimin e shkakut të origjinës së patologjisë. PCR në kohë reale përdoret gjithashtu për të përcaktuar një kulturë të pastër të agjentëve infektivë (gjenotipizimi).
Si bëhet testi i reaksionit zinxhir të polimerazës
Për diagnozë, mund të përdoret çdo lëng biologjik njerëzor. Biomaterial për testimin e hepatitit C është zakonisht gjaku.
Marrja e mostrave për diagnostikim kryhet në procedurë proceduralezyrë. Për të marrë gjak, përdorni epruveta të disponueshme me një substancë që pengon mpiksjen e gjakut. Aktivitetet e fokusuara në parandalimin e përhapjes së agjentëve infektivë ndihmojnë për të shmangur hyrjen e një lloji tjetër mikroorganizmash nga jashtë.
Gjaku për PCR të hepatitit C merret në mëngjes me stomakun bosh. Mostra dërgohet menjëherë në laborator. Lejohet të ruhet biomaterial në një temperaturë prej +4 deri +8 gradë Celsius. Kontejnerët janë të etiketuar dhe të pajisur me udhëzime. Rezultatet e testit janë të disponueshme brenda 48 orëve, ndonjëherë më shpejt.
Llojet e PCR
Diapazoni i aplikimit të reaksionit zinxhir të polimerazës është mjaft i gjerë. Infeksionistët përcaktojnë duke përdorur PCR hepatitin B, sëmundjet e transmetuara nga insektet gjakpirëse, SIDA, tuberkulozi. Në onkologji, duke përdorur këtë metodë, qelizat tumorale zbulohen në një fazë të hershme.
Ka rreth katërmbëdhjetë lloje analizash. Përdorimi i një ose një lloji tjetër varet nga qëllimi dhe rezultatet përfundimtare të analizave. Disa lloje të PCR janë të domosdoshme kur rezultati nevojitet brenda 20 minutave.
Për të diagnostikuar hepatitin C, përdoren 3 lloje të reaksionit zinxhir polimerazë:
- Vlerësimi cilësor mund të jetë ose pozitiv, që tregon praninë e një infeksioni në trup, ose negativ, që tregon mungesën e një flavivirusi.
- PCR në kohë reale (analiza sasiore) - përcakton ARN-në sasiore të patogjenit në IU/ml.
- Genotipizimi është një analizë që zbulon llojin (gjenotipin) e virusit.
Për të identifikuar dhe përcaktuar me saktësi sëmundjen, e ndjekur ngatë tre llojet e studimeve përdoren për të përshkruar terapinë optimale.
Analizë cilësore e reaksionit zinxhir të polimerazës
Një analizë është e detyrueshme për të gjithë ata që kanë një ELISA që ka zbuluar antitrupa ndaj HCV. PCR cilësore për hepatitin C është testi standard i ndjeshmërisë. Metoda synon vetëm zbulimin, nuk kryhet asnjë numërim apo izolim i substancave të tjera.
Për të zbuluar antitrupat, përdoren sisteme të veçanta testimi me një prag ndjeshmërie prej të paktën 50 IU/ml. Nëse zbulohen antitrupa, përshkruhen teste të tjera sqaruese. Nëse rezultati është negativ, nuk do të bëhet asnjë test i mëtejshëm.
Në disa raste, një rezultat i rremë negativ mund të jetë për shkak të stafit të paaftë të laboratorit ose reagentëve me cilësi të dobët. Për sigurimin, është më mirë të rimerrni analizën diku tjetër.
PCR sasiore
Metoda përdoret për të studiuar drejtpërdrejt numrin e flavivirusit në një cikël reagimi. Për matje të saktë, përdoren fragmente të ADN-së të përdorura për hibridizim ose primerë të etiketuar në mënyrë fluoreshente. Ekziston një opsion ekonomik i zbulimit duke përdorur bojën SYBL Green. Bojëja futet në një brazdë të vogël në ADN dhe bëhet blu kur rrezatohet me lazer.
Përqendrimi përcaktohet nga aparati-përforcues në ekuivalentin dixhital. Vlerat mund të ndryshojnë pak ndërmjet laboratorëve dhe për këtë arsye duhet të krahasohen me vlerat e referencës.
PCR sasiorehepatiti C ndihmon në zgjedhjen e dozës optimale të barnave dhe përcaktimin e kohëzgjatjes së terapisë. Frekuenca e studimit varet nga stadi i sëmundjes, lloji i gjenotipit dhe kursi i përshkruar i trajtimit.
Përcaktimi i gjenotipit
Virusi i hepatitit C ka një përbërje gjenetike të ndryshueshme. Modifikimet e shumta e bëjnë të pamundur krijimin e një vaksine, si dhe komplikojnë terapinë. Janë identifikuar dhe regjistruar gjithsej 11 gjenotipe dhe 100 nëntipe. Në vendet e ish-BRSS, te personat e infektuar me hepatit C, PCR zbulon kryesisht gjenotipet 1b dhe 3.
Në praninë e ndonjë prej gjenotipeve, cirroza ose kanceri i mëlçisë mund të gëzojnë. Kjo është arsyeja pse është kaq e rëndësishme për të zbuluar virusin në kohë.
Për disa pacientë, disa ilaçe të dizajnuara për të luftuar HCV janë toksike. Gjenotipi ju lejon të përcaktoni llojin e proteinës dhe të përshkruani një ilaç efektiv.
Në rezultatet e testeve të shtypjes ka një numër me shkronjë të vogël latine që tregon gjenotipin e virusit. Nëse HCV zbulohet por nuk shtypet, kjo do të thotë se personi ka një gjenotip që nuk është tipik për një zonë të caktuar gjeografike.
Rezultatet e analizës
Mjeku merret me deshifrimin e rezultateve. Vetëm të dhënat nga disa studime (së bashku me anamnezën dhe ekzaminimin) mund të japin një pamje të përgjithshme reale të historisë mjekësore.
- Në një person të shëndetshëm, një test për një reagim cilësor në biomaterial nuk zbulon asgjë. Nëse tregohet vlera "zbuluar", konfirmohet infeksioni dhe pacientika nevojë për diagnozë të mëtejshme të ndjekur nga trajtimi.
- Përcaktimi i numrit të agjentëve infektivë bën të mundur vlerësimin e ngarkesës virale në trup. Normalisht, PCR sasiore e hepatitit C nuk zbulon patogjenin. Një tregues deri në 810^5 konsiderohet si një ngarkesë e ulët dhe, me terapinë e duhur, garanton një rezultat të favorshëm. Vlerat më të larta kërkojnë ekzaminim të thelluar dhe përcaktimin e terapisë afatgjatë, për rezultatin pozitiv të së cilës askush nuk mund të garantojë.
- Rezultatet pozitive të gjenotipizimit tregojnë se cili gjenotip njihet. Një rezultat negativ tregon ose mungesën e një flavivirusi ose praninë e një gjenotipi që nuk është tipik për këtë rajon.
Çfarë tregon një test PCR pozitiv
Çdo sëmundje serioze kërkon një diagnozë gjithëpërfshirëse. Një PCR pozitiv i hepatitit C konfirmon diagnozën, por parashikimet mund të bëhen vetëm pas studimeve shtesë laboratorike dhe instrumentale.
Zbulimi i një virusi nuk jep një pamje të plotë të patologjisë. Është e nevojshme të identifikohet lloji dhe natyra e tij, të përcaktohet se si ndikon në mëlçi dhe organe të tjera. Zbulimi i hershëm i HCV shpesh ka një rezultat të favorshëm terapeutik.
PCR negative me ELISA pozitive
Kur vëzhgohen simptomat karakteristike të dëmtimit të mëlçisë, ekziston një probabilitet i lartë që infeksioni të ketë hyrë tashmë në trup. Prandaj, duhet të kontaktoni një hepatolog ose një specialist të sëmundjeve infektive. Gjatë intervistave, specialisti do të mbledhë një anamnezë dhe do të përshkruajë ekzaminimin e nevojshëm.
Nëserezultatet e studimeve për PCR të hepatitit C janë negative, dhe analiza e imunitetit të enzimës është pozitive, kjo tregon praninë e antitrupave ndaj flavivirusit në gjak. Kjo zakonisht ndodh kur infeksioni hyn në trup në një sasi të vogël, kështu që sistemi imunitar e përballoi vetë. Por persona të tillë ende konsiderohen të infektuar dhe kërkohet që të ekzaminohen çdo 6 muaj. Nëse, me rezultate të tilla testi, një personi i mohohet një ekzaminim mjekësor falas, është më mirë të kryeni PCR për një tarifë për të ruajtur shëndetin dhe nëse rezultatet janë pozitive, kontaktoni një specialist për diagnozë dhe trajtim.
Përparësitë dhe disavantazhet e metodës
Kur vendos diagnozën e hepatitit C, PCR ka disa përparësi:
- Zbulimi i hershëm i patogjenit.
- Përkufizimi i saktë i virusit.
- Efikasiteti i diagnostikimit.
- Shkalla minimale e gabimit.
- Ndjeshmëri e lartë.
Disavantazhet e metodës:
- Kosto e lartë e analizës. Testi kërkon pajisje të shtrenjta, reagentë dhe staf mjekësor shumë të kualifikuar. Të gjitha së bashku përbëjnë një sasi të konsiderueshme.
- Kërkesa strikte për transportin e biomaterialit.
Trajtimi i inflamacionit të mëlçisë
Analiza PCR për virusin e hepatitit C konsiderohet thelbësore për diagnozën, por jo përfundimtare. Që terapia të jetë efektive, nevojiten një sërë studimesh shtesë laboratorike dhe instrumentale. Pasi ka kaluar të gjithamasat diagnostike që mjeku përshkruan trajtimin:
- Dieta 5 është e përshkruar.
- Alkooli është plotësisht i përjashtuar.
- Marrja e përbashkët e Interferonit dhe Ribavirinës për 25 ditë.
- Kurse të hepaprotektorëve "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Në raste të veçanta përdoret plazmafereza diskrete.
Ilaçet e përshkruara nga mjeku hepatolog përdoren rregullisht, pa ndryshuar dozën. Kohëzgjatja e marrjes së barnave përcaktohet nga mjeku pas kalimit të testeve të kontrollit. Pas përfundimit të kursit të terapisë, duhet të vizitoni mjekun çdo gjashtë muaj.
PCR-diagnostika lejon identifikimin e agjentit shkaktar të hepatitit C në një fazë të hershme. Kjo kontribuon në efektivitetin e terapisë dhe parandalimin e kalimit të sëmundjes në forma të tilla të rrezikshme si cirroza dhe karcinoma hepatocelulare.
